-->
|
|
|
Ãëàâà 13. Àìèíîêèñëîòû. Ïåïòèäû. Áåëêè Ôèçèêî-õèìè÷åñêèå ñâîéñòâà áåëêîâÔèçè÷åñêèå ñâîéñòâà è èäåíòèôèêàöèÿ áåëêîâÁåëêè íå èìåþò òî÷íî îïðåäåëåííîé òåìïåðàòóðû ïëàâëåíèÿ. Íàãðåâàíèå âûçûâàåò äåíàòóðàöèþ èëè ðàçëîæåíèå áåëêà. Ïîýòîìó èäåíòèôèöèðîâàòü èõ ïî òî÷êå ïëàâëåíèÿ íåëüçÿ. Äëÿ îïðåäåëåíèÿ ÷èñòîòû áåëêà èëè åãî îòíîñèòåëüíîé ìîëåêóëÿðíîé ìàññû èñïîëüçóåòñÿ óëüòðàöåíòðèôóãèðîâàíèå. Îáðàçöû áåëêîâûõ ðàñòâîðîâ ïîìåùàþò â ñïåöèàëüíûé àïïàðàò — óëüòðàöåíòðèôóãó è âðàùàþò ñ âûñîêîé ñêîðîñòüþ. Ñêîðîñòü îñåäàíèÿ áåëêîâ è îáðàçîâàíèÿ îñàäêîâ çàâèñèò îò èõ îòíîñèòåëüíîé ìîëåêóëÿðíîé ìàññû, ôîðìû è ïëîòíîñòè. ×èñòûå è íåî÷èùåííûå áåëêè èìåþò ðàçëè÷íûå ñêîðîñòè îñàæäåíèÿ. Õèìè÷åñêèå ñâîéñòâà áåëêîâ1. Áåëêîâûå ìîëåêóëû ñîäåðæàò áîëüøîå ÷èñëî ñïîñîáíûõ ê äèññîöèàöèè êàðáîêñèëüíûõ è àìèíîãðóïï.
2. Êà÷åñòâåííûå ðåàêöèè íà áåëêè. Äëÿ àíàëèòè÷åñêîãî îáíàðóæåíèÿ áåëêîâ â ðàñòâîðå ÷àñòî èñïîëüçóþòñÿ áèóðåòîâàÿ è êñàíòîïðîòåèíîâàÿ ðåàêöèè. Ïåðâàÿ íàïðàâëåíà íà îáíàðóæåíèå ïåïòèäíûõ ñâÿçåé. Ïðè ïðîâåäåíèè áèóðåòîâîé ðåàêöèè ê èññëåäóåìîìó ðàñòâîðó ïðèëèâàþò ðàñòâîðû ùåëî÷è è ñîëè ìåäè (II). Ïðèñóòñòâèå áåëêîâ îáíàðóæèâàåòñÿ ïî ïîÿâëåíèþ ôèîëåòîâîé îêðàñêè. Áèóðåòîâàÿ ðåàêöèÿ òàêæå ïðèìåíÿåòñÿ äëÿ îïðåäåëåíèÿ êîíöåíòðàöèè áåëêà â ðàñòâîðå. Èíòåíñèâíîñòü ôèîëåòîâîé îêðàñêè, îïðåäåëÿåìàÿ êîëè÷åñòâåííî ñ ïîìîùè ÓÔ-ñïåêòðîñêîïèè, ïðîïîðöèîíàëüíà êîíöåíòðàöèè áåëêà. Êñàíòîïðîòåèíîâàÿ ðåàêöèÿ (îò ãðå÷. xanthos— «ðûæèé») îòíîñèòñÿ ê ÷èñëó ÷àñòíûõ ðåàêöèé, ïîçâîëÿþùèõ îáíàðóæèòü îïðåäåëåííûå àìèíîêèñëîòû. Îíà îñóùåñòâëÿåòñÿ íàãðåâàíèåì ðàñòâîðà áåëêà ñ êîíöåíòðèðîâàííîé àçîòíîé êèñëîòîé. Ïðè ýòîì âîçíèêàåò æåëòîå îêðàøèâàíèå.  ðåçóëüòàòå íèòðîâàíèÿ áåíçîëüíûõ êîëåö áîêîâûõ öåïåé àìèíîêèñëîòíûõ ðàäèêàëîâ óäàåòñÿ îáíàðóæèòü ôåíèëàëàíèí, òèðîçèí, ãèñòèäèí, òðèïòîôàí. Ïðè îæîãå êîæè àçîòíîé êèñëîòîé ïîÿâëÿåòñÿ æåëòîå ïÿòíî. 3. Ãèäðîëèç áåëêîâ — ðåàêöèÿ, îáðàòíàÿ ñèíòåçó áåëêîâ, îñóùåñòâëÿåòñÿ ïðè äåéñòâèè ôåðìåíòîâ èëè ïðè äëèòåëüíîì êèïÿ÷åíèè áåëêîâ â ïðèñóòñòâèè ñèëüíûõ êèñëîò èëè ùåëî÷åé.  ðåçóëüòàòå ïîëíîãî ãèäðîëèçà áåëêîâ ïîëó÷àåòñÿ ñìåñü èç àìèíîêèñëîò. Ãèäðîëèç áåëêîâ èìååò îãðîìíîå çíà÷åíèå â èññëåäîâàíèè ñîñòàâà áåëêîâ.
Îñíîâíûå ïîíÿòèÿ Äåíàòóðàöèÿ, ðåíàòóðàöèÿ. Áèóðåòîâàÿ, êñàíòî- ïðîòåèíîâàÿ ðåàêöèè Âîïðîñû è çàäàíèÿ
|
|
|